Chemiluminescence Immunoassay, CLIA ایک انتہائی حساس immunoassay تکنیک ہے۔
1. اصول
Chemiluminescence immunoassay مدافعتی ردعمل کی خصوصیت اور chemiluminescence کی اعلی حساسیت کو یکجا کرتا ہے۔ اس کا بنیادی اصول اینٹیجن اور اینٹی باڈی کے درمیان مخصوص مدافعتی ردعمل کو chemiluminescence ردعمل کے ساتھ جوڑنا ہے۔ خاص طور پر، ٹیسٹ کیے جانے والے نمونے میں موجود اینٹیجن ایک مخصوص اینٹی باڈی کے ساتھ مل کر ایک مدافعتی کمپلیکس بناتا ہے۔ پھر، کیمیائی رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے، مدافعتی کمپلیکس ایک کیمیلومینسنٹ سگنل پیدا کرتا ہے۔ luminescence کی شدت جانچے جانے والے اینٹیجن کے ارتکاز کے متناسب ہے، اور ٹیسٹ کیے جانے والے اینٹیجن کے مواد کا luminescence کی شدت کا پتہ لگا کر مقداری تجزیہ کیا جا سکتا ہے۔
2. اہم اجزاء
اینٹی باڈیز: بشمول کیپچر اینٹی باڈیز اور ڈیٹیکشن اینٹی باڈیز۔ کیپچر اینٹی باڈی کو عام طور پر ٹھوس فیز کیریئر پر لگایا جاتا ہے تاکہ ٹیسٹ کیے جانے والے اینٹیجن کو پکڑ سکے۔ مدافعتی کمپلیکس میں اینٹیجن کا پتہ لگانے کے لئے پتہ لگانے والے اینٹی باڈی کو کیمیلومینیسینٹ مارکر کے ساتھ ملایا جاتا ہے۔
ٹھوس مرحلہ کیریئر: جیسے مائکرو پلیٹس، مقناطیسی موتیوں، وغیرہ، کیپچر اینٹی باڈی کو درست کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے تاکہ مدافعتی ردعمل اور علیحدگی اور دھونے میں آسانی ہو۔
Chemiluminescent مارکر: عام طور پر ایک ایسا مادہ جو کیمیائی رد عمل میں ایک چمکیلی سگنل پیدا کر سکتا ہے، جیسے luminol، acridinium ester، وغیرہ۔ مارکر مدافعتی ردعمل کے بعد ایک chemiluminescent سگنل پیدا کرنے کے لیے پتہ لگانے والے اینٹی باڈی کے ساتھ مل جاتا ہے۔
پتہ لگانے کا نظام: بشمول luminescence ڈیٹیکٹر جیسے آلات، جو chemiluminescent سگنلز کی شدت کا پتہ لگانے اور انہیں پڑھنے کے قابل قدروں میں تبدیل کرنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔
3. خصوصیات
زیادہ حساسیت: یہ ٹیسٹ مادہ کی انتہائی کم ارتکاز کا پتہ لگا سکتا ہے، جو کہ عام طور پر امیونوسے روایتی طریقوں سے زیادہ حساسیت کے کئی آرڈرز ہوتے ہیں۔
وسیع لکیری رینج: ٹیسٹ مادہ کے مواد کو ایک سے زیادہ ڈائیوشنز کے بغیر وسیع ارتکاز کی حد میں درست طریقے سے ماپا جا سکتا ہے۔
مضبوط خصوصیت: اینٹیجن اور اینٹی باڈی کی مخصوص پابندی کی بنیاد پر، یہ مخصوص ٹیسٹ مادوں کے لیے انتہائی منتخب ہے۔
تیز: پتہ لگانے کا عمل نسبتاً تیز ہے اور نتائج عام طور پر کم وقت میں حاصل کیے جا سکتے ہیں۔
آٹومیشن کی اعلی ڈگری: یہ بڑے پیمانے پر نمونوں کا پتہ لگانے کے لئے موزوں ہے اور پتہ لگانے کی کارکردگی کو بہتر بنانے کے لئے خودکار آلات کے ساتھ مل کر استعمال کیا جا سکتا ہے۔
4. درخواست کے علاقے
طبی تشخیص: اس کا استعمال مختلف بائیو مارکرز، جیسے ٹیومر مارکر، ہارمونز، متعدی بیماری کے مارکر وغیرہ کا پتہ لگانے کے لیے کیا جاتا ہے، تاکہ بیماری کی تشخیص، علاج کی نگرانی اور تشخیص کے لیے اہم بنیاد فراہم کی جا سکے۔
منشیات کی نشوونما: یہ منشیات کی حراستی کی نگرانی، افادیت کی تشخیص اور منشیات کے میٹابولزم کی تحقیق کے لیے استعمال ہوتی ہے۔
فوڈ سیفٹی ٹیسٹنگ: کھانے میں نقصان دہ مادوں، کیڑے مار ادویات کی باقیات، ویٹرنری ادویات کی باقیات وغیرہ کا پتہ لگانا۔
ماحولیاتی نگرانی: ماحول میں آلودگی اور زہریلے مادوں کا پتہ لگانا۔